厭氧培養(yǎng)箱的核心在于維持無氧、無菌、恒溫的環(huán)境，日常操作需圍繞這三點展開。以下是基于實驗室管理規(guī)范的詳細注意事項：

一、 核心環(huán)境控制：維持“無氧"狀態(tài)

氣體管理是生命線

氣源純度：必須使用高純度氣體（氮氣、氫氣、二氧化碳純度通常需≥99.99%）。雜質(zhì)氣體會污染箱體，甚至毒化催化劑。

氣瓶壓力：隨時關注氣瓶壓力表，當壓力低于2MPa時，應及時更換氣瓶，防止氣體耗盡導致環(huán)境破壞。

氣體比例：嚴格按照實驗需求設定混合氣體比例（如N?:H?:CO? = 85:5:10），比例失調(diào)會影響菌種生長。

密封性檢查

手套與袖套：每次操作前檢查手套是否有破損或針孔。若發(fā)現(xiàn)漏氣，必須立即更換，否則氧氣會迅速滲入。

密封圈：定期檢查艙門和傳遞艙的密封圈是否老化、變形。若失去彈性，需及時涂抹硅脂或更換。

催化劑（鈀粒）狀態(tài)

顏色判斷：鈀粒是除氧的關鍵。正常應為灰白色，若變?yōu)樯罨疑蚝谏?，說明已吸附飽和，需立即取出進行160℃烘烤2小時再生。

再生周期：建議每周或每兩周進行一次再生處理，確保除氧效率。

二、 無菌操作：防止污染

進出物品消毒

傳遞艙使用：所有物品（包括樣品、試劑、工具）必須通過傳遞艙進出。嚴禁直接打開內(nèi)門，否則會瞬間破壞厭氧環(huán)境。

消毒流程：物品放入傳遞艙后，需先抽真空，再充入氮氣，重復2-3次，確保氧氣被*底置換。對于不耐真空的物品，需用75%酒精或消毒劑充分擦拭表面。

箱內(nèi)清潔

定期擦拭：每周至少用75%酒精或?qū)Ｓ孟緞┎潦脙?nèi)壁、擱架和手套一次，防止微生物滋生。

水盤管理：若箱體自帶加濕水盤，必須使用無菌蒸餾水，并定期更換，防止細菌污染。

個人衛(wèi)生

操作前必須佩戴干凈的手套，避免將皮膚上的好氧菌帶入箱內(nèi)。

三、 安全操作：預防危險

氫氣安全（重中之重）

嚴禁明火：厭氧箱內(nèi)通常含有氫氣（作為還原氣體）。操作時箱體周圍嚴禁吸煙、使用電爐或產(chǎn)生電火花的設備。

泄漏檢測：若聞到異味或懷疑氫氣泄漏，應立即關閉氣源，打開實驗室通風，嚴禁開關電器（防止電火花引爆）。

生物安全

若培養(yǎng)病原微生物，操作時必須佩戴雙層手套，并在生物安全柜內(nèi)進行樣品預處理。廢液和廢棄物需經(jīng)高壓滅菌后再處理。

電氣安全

保持箱體干燥，防止液體濺入控制面板。定期檢查電源線和接地是否良好。